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宠物食品脂肪含量怎么测？
BUCHI 方法让数据说话
饲料应用
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介绍
铲屎官们买粮时最关注什么？配料表第一位是不是肉、粗脂肪含量准不准、有没有虚标…… 作为宠物食品研发人员，你肯定遇到过这样的灵魂拷问："你们标14%的脂肪，凭什么让消费者相信？"
很多小伙伴会问：为什么不能直接用石油醚萃取？原因是宠物食品中（尤其是膨化干粮、罐头、冻干）的脂肪往往以结合态存在——与蛋白质、碳水化合物形成复合物，被基质"包裹"着。如果不先破坏这个结构，测出来的只是"游离脂肪"，远低于真实值。
本应用说明描述了根据Weibull-Stoldt方法对认证食品样品进行总脂肪含量测定的程序。样品采用手动水解，使用脂肪萃取仪E-500进行索氏提取。提取物经干燥至恒重后，通过重量法计算总脂肪含量。测得的脂肪含量与参考物质的认证值相符良好。
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设备
均质仪 B-400
脂肪萃取仪 E-500
分析天平（精度 ±0.1 mg）
干燥箱 / 真空干燥箱
▲ E-500
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试剂与样品
试剂：
4 mol/L 盐酸
石油醚，沸程 40-60°
标准参考样品：
脂肪含量为 15.67g/100 g（±0.219g/100g）的认证黄油饼干，
煮制香肠，经认证脂肪含量为13.90g/100g（±0.391g/100 g）
水果冰淇淋混合物，经认证脂肪含量为 5.07g/100g（±0.065g/100g）
市场购买的商品：
黄油饼干，标注脂肪含量15%
早餐麦片，标注脂肪含量为12%
宠物食品颗粒，标注脂肪含量14%
香草冰淇淋，标注脂肪含量13%
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实验过程
样品均质化
用 4M 盐酸水解样品以分解基质过滤水解液以分离脂肪
过滤样品的干燥
索氏提取法提取脂肪提取物的干燥
称重并计算脂肪含量
4.1 样品均质
图1 显示了均质后的样品。
▲ 图1：均质化样品。从上至下，顺时针方向依次为：早餐麦片、煮熟的香肠、宠物食品、两种饼干样品、两种冰淇淋样品。
4.2 酸水解
在 250mL 烧杯中放入 4-5 粒干燥的沸石，并称取最多 6g 的均匀样品。对于发泡性样品，建议使用更少的样品量，先加入 50mL 4M 盐酸，轻轻搅拌，再加入 50 mL 4M 盐酸，冲洗烧杯内壁。将烧杯放在加热板上，并用玻璃钟罩盖住。保持低火加热，以防样品过度飞溅到容器壁上。持续加热，直至达到稳定的小沸腾状态。煮沸后，让样品水解 30 分钟。准备一个带有消化管、玻璃漏斗和折叠滤纸的架子。用沸水润湿滤纸。佩戴隔热防护手套。见图2。
▲ 图2：手动水解装置
水解结束后，用钳子小心地将烧杯从加热板上取下。为每个样品准备至少 500mL 的沸水。冲洗时，应尽量保持水温接近沸点。如果水温下降，会影响过滤效果，将溶液通过滤器过滤，并用沸水冲洗烧杯，直至样品完全转移。通常冲洗三次即可。冲洗滤纸，确保将所有滤纸彻底冲洗干净，见 图3。用至少 300mL 的沸水彻底冲洗每张滤纸，直至滤液的 pH 值达到中性，使用试纸检测 pH 值。见 图4。
▲ 图3（左）：滤纸的冲洗。图4（右）：水解后的滤纸上样品。
用镊子将滤纸对折后放入滤纸筒中，再将滤纸置于纤维素滤纸筒内，将滤纸筒和烧杯在 102±2°C 的干燥箱中干燥 1 小时 30 分钟，将样品和烧杯在干燥器中冷却至室温。
4.3 索氏抽提法
待干燥的烧杯冷却后，将滤纸放入滤纸架中。把滤纸放入萃取室，并根据滤纸高度（用铅笔标记）调整液位传感器。见图5。
▲ 图5：根据滤纸高度处的铅笔标记放置液位传感器。
将溶剂直接倒入烧杯中，并将其放置在相应的加热板上。关闭安全防护罩，放下支架。或者，在放下支架后通过冷凝管加入溶剂。激活已占用的位置，打开冷却水或启动连接的冷水机，然后根据 表1 中列出的参数开始萃取。
表1：使用脂肪萃取仪 E-500 进行索氏提取的参数
4.4 萃取物的干燥
将萃取后的溶剂杯放入102°C的干燥箱中，直至达到恒定重量。然后在干燥器中冷却至室温至少 1 小时，记录其重量。
4.5 计算
结果根据 公式（1）计算为脂肪含量的百分比。
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结果
认证参考物质的测定脂肪含量与认证和标示值一致。大多数样品的相对标准偏差（RSD）较低或非常低，仅煮制香肠样品的 RSD 较高。完整结果汇总于表2至表7中。
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结论
采用手动水解法并使用 BUCHI 脂肪萃取仪 E-500 进行索氏提取测定食品中的脂肪含量，可获得可靠且可重复的结果。测定结果与标签值相符，大多数样品的相对标准偏差（RSD）较低，煮制香肠的相对标准偏差也处于可接受范围。
手工水解方法费时费力。对于 3 个平行样品，水解后平均需要 60 分钟进行彻底冲洗。在将样品从烧杯转移至滤器时，必须特别注意避免因飞溅导致样品损失。H-506 是手工水解过程的一种优良且安全的替代方案。
▲ H-506
